كروموتوغرافيا الترشيح بالهلام Gel. Filtration Chromotography

تعتمد طريقة كرموتوغراقيا الترشيح بالهلام على الاختلاف في حركة المركبات الذائبة خلال المواد الهلامية ذات المسامات المنتظمة جزئيا ويستخدم لغرض الفصل بهذه الطريقة عمود مملوء بالمستحلب الراكد من أحد أنواع حبيبات الترشيح الهلامي.

تعمل حبيبات الترشيح الهلامى كغربال جزئي حيث يتم فصل البروتينات عن كبريتات الألومونيوم المتحدة بها بفترات زمنية متلاحقة ويكون الفصل معتمدا على حجم السائل الخالي ، ويعتبر الراشح بالهلام أحد الطرق المهمة المستعملة كثيرا لفصل البروتينات عن الأملاح Desalting.

وبصورة خاصة فإن مسامات هذه المواد الهلامية تكون منتظمة: لذا فمن الضروري أن يحتوى عمود الترشيح الهلامى على هذه المسامات موزعة بمعدل حجم المسام . فلو وضعنا حجماً صغيرا من محلول يحتوى على خليط من البروتينات ذات الأوزان الجزيئية 30000 ، 40000 ، 50000 ، 60000 ، 70000 على قمة عمود يحتوى على هلام ذي أحجام مسامات 15000 و 50000 لوجدنا أن البروتين ذا الوزن الجزيئي ١٠٠٠٠٠ يطرد من هذه المسامات ويتحرك خلال العمود بالسائل الخالي الموجود. اما البروتينات فتدخل في المسامات بصورة جزئية وتنضح خارج العمود بأوقات زمنية مختلفة وبحجوم مختلفة تتراوح بين السائل الخالي وحجم السائل الكلي الذي تتضح منه البروتينات ذو الوزن الجزئي ٣٠٠٠٠ باعتباره من الأوزان الجزيئية الصغيرة الداخنة كلياً في مسامات الحبيبات.

تعتمد آلية كروموتوغرافيا الهلام على التأثير الفراغي والشحنة الجزيئية بقوة ايونية منخفضة جداً حيث تطرد الجزيئات الصغيرة ذات الشحنة السالبة من الثقوب حتى في كون الحجم كاف. وهذا يعود إلى التصادم الكهروستاتيكي بين الجزئيات ، وبالتالي في الثقب بوقت محدد. وفي ايونية منخفضة جداً هناك تأثيرات امتزازية في بعض أنواع الهلامات .