الغرض من الاختبار Purpose

يستعمل هذا الاختبار للتعرف التخميني والتمايز بين البكتيريا المعوية.

مبدأ الاختبار Principle

يستعمل هذا الاختبار لتحديد إذا كان الكائن الحي قادرا على تحلل glycoside Esculin إلى Esculetin، الذي يتفاعل مع ايون Fe+3 ويكون راسبا ذا لون بني داكن الى الأسود.

الوسط الزرعي Media

اذابة (8غم ) من كلوريد الصوديوم (NaCl) ، و ( 0,4غم) فوسفات البوتاسيوم احادية الهيدروجين K2HPO4 ،( 1, 0غم) فوسفات البوتاسيوم ثنائي الهيدروجين KH2PO4 ،( 5غم ) اسكولين Esculin ، (0,5غم) Ferric ammonium citrate ,( 15غم) اكار، في كمية من الماء المقطر ويعدل الاس الهيدروجيني الى 7,7 ويكمل الحجم الى 1000مل ويعقم بجهاز الموصدة بدرجة 121 وبضغط 15 باوند /انج 2 ولمدة 15 دقيقة. ثم وزع في انابيب وتترك بالشكل مائل لحين تصلبها ( ملاحظة يفضل توزيع الوسط في انابيب ثم تعقم )

طريقة العمل Method

1- يلقح الوسط بقطرة واحدة من مزرعة سائلة بعمر (24 ساعة).

 2- حضن الوسط بظروف هوائية بدرجة (35-37) م لمدة (7 أيام).

3- اختبار تكون اللون الاسود في الوسط الزرعي و اختبار تحت الاشعة فوق البنفسجية بمصباح وود (Wood's lamp ) للكشف عن التحلل المائي للأسكولين.

النتائج المتوقعة Expected Results

النتيجة الموجبة اسوداد الوسط الزرعي مع فقدان التألق الضوئي تحت مصباح

Wood ، الشكل (19-A)

النتيجة السالبة: عدم اسوداد الوسط الزري او اسوداد طفيف مع عدم فقدان التألق الضوئي الشكل (19-B)

الملاحظات :

1- يعد وسط Esculin hydrolysis غير انتقائي.

2- يعد وسط Bile esculin hydrolysis انتقائيا وتفريقي .