أقرأ أيضاً
التاريخ: 27-3-2021
2328
التاريخ: 2023-11-16
1165
التاريخ: 2024-04-14
646
التاريخ: 2024-06-11
518
|
تم تقدير فيتامين C باستخدام طريقة الباحث (Stanley, et al., 1979):
المبدأ الأساس : Basic principle
إن حامض الاسكوربيك يتأكسد بواسطة النحاس ليكون ديهايدرو حامض الاسكوربيك dehydroascorbic acid وحامض ثنائي كيتوكلونيك Diketogluonic acid وهذه النواتج تتفاعل مع 4-2 ثنائي فنيل هيدرازين لتكون مشتق بس-4-2 ثنائي نايتروفينل هيدرازون وهذا المركب بإضافة حامض الكبريتيك المركز تحصل له إعادة ترتيب ليكون ناتجاً يعطي حزمة امتصاصية عند الطول الموجي 520 nm إن التفاعل أعلاه يجرى بوجود الثايوريا الذي بواسطته يتم الحصول على وسط اختزال معتدل يعمل على منع التداخلات مع مواد أخرى .
تحضير الكواشف : Preparation of Reagents
-1 محلول 5% ، 10% ثلاثي كلورو حامض الخليك (TCA)في الماء المقطر .
-2محلول 2-4 ثنائي نايترو فنيل هيدرازين/ثايوريا/نحاس (DTC) copper/Thiourea/2,4-dinitrophenylhydrazine يحضر بأخذ 3gm من 4-2 ثنائي نايترو فنيل هيدرازين ، 0.05gm كبريتات النحاس المائية CuSO4.5H2O و0.4gm من الثايوريا أذيبت جميعا في ( mL (100 من H2SO4 (9N) .
-3 محلول 65% حامض الكبريتيك .
طريقة العمل : Procedure
يمزج في أنبوبة اختبار 0.5 mL من مصل الدم مع 0.5 mL من 10% TCA وتوضع في جهاز الطرد المركزي بسرعة 3500g ولمدة 20 دقيقة وذلك لترسيب البروتين . ثم تتم الإضافة كما هو موضح في الجدول الآتي :
يمزج المحلول جيدا ويترك في درجة حرارة الغرفة لمدة 30دقيقة ثم تقاس شدة الامتصاص عند520nm .
الحسابات : Calculations
تم تقدير تركيز فيتامين C في الدم باستخدام المنحني القياسي لفيتامين C الذي حضر بأخذ تراكيز مختلفة من محلول فيتامين C القياسي (2mg/100mL) تتراوح بين (20-0) µg/mL وتم استخدام محلول 5% TCA لتحضير المنحني القياسي.
|
|
تفوقت في الاختبار على الجميع.. فاكهة "خارقة" في عالم التغذية
|
|
|
|
|
أمين عام أوبك: النفط الخام والغاز الطبيعي "هبة من الله"
|
|
|
|
|
قسم شؤون المعارف ينظم دورة عن آليات عمل الفهارس الفنية للموسوعات والكتب لملاكاته
|
|
|