المرجع الالكتروني للمعلوماتية
المرجع الألكتروني للمعلوماتية
Untitled Document
أبحث عن شيء أخر المرجع الالكتروني للمعلوماتية

التقنية الحيوية الحاسوبية In Silico Biotechnology
18-9-2018
Lactulose
9-11-2018
Cap
12-2-2022
الأمراض الفيروسية في الكنتالوب
2024-10-01
Chernoff Face
27-4-2021
إسحاق بن إبراهيم الموصلي
21-06-2015


استخلاص الDNA والRNA


  

204       11:22 صباحاً       التاريخ: 2024-12-29              المصدر: أ.د. علي حمود السعدي

أقرأ أيضاً
التاريخ: 28-4-2021 1961
التاريخ: 9-12-2015 2174
التاريخ: 17-3-2021 1643
التاريخ: 5-6-2017 1534
التاريخ: 26-7-2019 1484
لا بد وفي أية تجربة يستخدم فيها الجين من الحاجة إلى مصدر يُستخلص منه الحامض النووي سواء كان DNA أو RNA، وتتضمّن الخطوة الأولى في عملية الاستخلاص تفتيت المادة الأولية سواء كانت فايروسية أو بكتيرية أو فطرية أو نباتية أو حيوانية، ولتجنّب تضرر الأحماض النووية المراد استخلاصها، يُفضّل استخدام الإنزيمات المحللة للجدار الخلوي (فيما يتعلق بالخلايا الحاوية على الجدار مثل الخلايا النباتية)، مع استعمال المنظفات الكيمياوية المحللة للأغشية الخلوية. هذا ويُراعى عند الضرورة استخدام طريقة أكثر قساوة في سبيل تمزيق الخلايا (كما هو الحال لبعض الأجزاء النباتية)، إذ إنه قد يتعرّض الـDNA للتقطيع، الأمر الذي قد يعيق إنتاج الجزيئات التركيبية النموذجية.
بعد عملية تمزيق الخلايا يتم التخلّص من البروتينات بالفينول أو خليط الفينول كلوروفورم مع الطرد المركزي، لتتجمّع الجزيئات البروتينية في طبقة الفينول الوسطى، وتتجمّع الأحماض النووية في الطبقة العليا للمحلول والتي يتم ترسيبها فيما بعد باستخدام الآيزوبروبانول (Isopropanol) أو الإيثانول المبرد خلال الطرد المركزي. في حالة استخلاص الـDNA يُستخدم الإنزيم Ribonuclease) RNase) للتخلّص من الRNA، أما في حالة استخلاص الmRNA بهدف تصنيع الDNA المكمّل (cDNA) فيتم استخدام أعمدة السليلوز المربوط مع سلاسل الثايمين القصيرة Oligo(dT)-cellulose التي ترتبط مع الذيل متعدّد الأدنين (Poly-A) الموجود في خيوط mRNA ، إذ يُعطي هذا الأسلوب كمية كبيرة من الmRNA ويُزيل أغلب المخلفات العالقة به  .
src=../../../medea/images/4_961.png
هذا ويستخدم الطرد المركزي فائق السرعة (Ultracentrifugation) لتحضير ال DNA البلازميدي باستخدام محلول كلوريد السيزيوم( CsCl) Cesium chloride  متدرّج الكثافة، وبعد فترة تصل إلى 48 ساعة يتكثف الـDNA البلازميدي ويكون طبقة في مكان محدد في أنبوبة الاختبار، إذ تؤخذ هذه الطبقة ويتم التخلص من بقايا كلوريد السيزيوم من أجل الحصول على DNA نقي.


Untitled Document
جواد مرتضى
عراقيّةٌ أنجبَتْهَا الفحولةُ من العربِ
د. فاضل حسن شريف
اشارات قرآنية من كتاب باب الحوائج الإمام الكاظم...
عبدالله مرتضى محمد تقي الحسيني
المبعث النبوي: نور ورحمة وهداية
د. فاضل حسن شريف
اشارات قرآنية من كتاب باب الحوائج الإمام الكاظم...
ياسين فؤاد الشريفي
الموز الأزرق!
جواد مرتضى
حرمة الخمر قرآنيا
جواد مرتضى
السيّد مُحمّد سبعُ الدُّجَيل
حسن علاء
لقيط أبو رزين المنتفقي
د. فاضل حسن شريف
اشارات الامام موسى الكاظم عليه السلام عن القرآن...
جواد مرتضى
نصرة الامام الكاظم لأهل البيت (عليهم السلام)
د. فاضل حسن شريف
اشارات الامام موسى الكاظم عليه السلام عن القرآن...
الشيخ أحمد الساعدي
مصابك يا موسى أبن جعفر (ع) أدمى قلوبنا
د. فاضل حسن شريف
اشارات الامام الهادي عليه السلام عن القرآن الكريم من...
جواد مرتضى
السفير الثاني: محمد بن عثمان العمريّ الخلّانيّ