Campylobacter Spp

هذا الجنس البكتيري شائع التواجد في الطبيعة ، حيث تم عزله من البيئات المائية المختلفة (مياه عذبة ومالحة) كما يتواجد بأعداد كبيرة في مياه الصرف الصحي وهو يتواجد بأعداد قليلة في المياه السطحية مقارنة بأعداد في مياه الصرف الصحي أما في المياه الجوفية فلهذا الجنس البكتيري القدرة على البقاء لعدة أسابيع عند درجة حرارة 4 درجات مئوية ويعتبر النوع البكتيري C. jejuni أكثرهم تواجداً في البيئات المائية مقارنة بالأنواع الأخرى من النوع البكتيري C. coli والنوع البكتيري C. lari. لا يعرف حتى الآن دور هذا الجنس البكتيري في احاديث الاصابات عند البشر كنتيجة لتواجدها في المياه نظراً لعدم معرفة طريقة انتقالها للإنسان وأيضاً لعدم توفر معلومات كافية حول مدى بقائها في مختلف البيئات ، حيث أظهرت بعض الدراسات قدرة هذا الجنس البكتيري على البقاء فقط لعدة ساعاة في الظروف البيئية غير الملائمة وذلك نتيجة لتغير درجات الحرارة، ومن خلال الدراسات المعملية تبين أنه قادر على البقاء لفترات طويلة في درجات الحرارة المنخفضة والتي قد تدوم لعدة أيام (4 درجات مئوية) كما أن تواجده يزداد في جود أجناس بكتيرية اخرى في الغشاء الحيوي biofilm ، كما أن بعض الأبحاث اظهرت ان للجنس البكتيري Campylobacter Spp القدرة على البقاء في البيئات المائية للفترات طويلة تتراوح من عدة أسابيع إلى عدة أشهر عند درجة حرارة أقل من 15 درجة مئوية ، كما تأكدك عدم وجوده في المياه المعالجة وإذا ماتم تحديد تواجده في المياه المعالجة بالكلور فهذا دليل على تلوث المياه بعد عملية التطهير أو لعدم كفاءة عملية المعالجة.

الامراضية :

يسبب النوع البكتيري C. jejuni والنوع البكتيري C. coli النزلات المعوية على هيئة إسهال مائي  toxigenic  watery  diarrhea أو زحارdysentary ولهم القدرة على إفراز ذيفانات معوية enterotoxins واخرى مدمرة للخلايا cytotoxins . في الدول النامية يسبب هذين النوعين غالباً الإصابات في الأطفال الذين أعمارهم تقل عن عامين. ويتواجد هذا الجنس البكتيري في القانة الهضمية للدواجن والخراف والماعز والماشية والعديد من الحيوانات ، وبذلك يعتبر الدواجن والحليب غير المبستر وكذلك المياه الملوثة هم المصدر الرئيسي للإصابة ويعتقد أن المياه الجوفية الحيوانية حيث توفر طبقات الأرض السفلى الظروف البيئية الملائمة لنمو هذا الجنس البكتيري وبقائه ، ويزداد معدل انتشار الجانحات الناتجة من هذا الجنس البكتيري بمعدل تناول المياه الملوثة أو غير المعالجة، ففي بريطانيا يعتبر هذا الجنس البكتيري المصدر الرئيسي للحائجات الناتجة جراء تناول المياه الملوثة وغير المعالجة بطريقة جيدة ، كما يعتبر النوع البكتيري C. jejuni HS50 PT35 المسبب الرئيسي للجانحات الناتجة من استعمال إمدادات المياه الخاصة، وهي نادراً ما يتم عزلها. في كندا يعتبر النوع البكتيري Campylobacter Spp المسبب الرئيسي للنزلات المعوية وفي أغلب الدوال الأوربية تعتبر من الأجناس البكتيرية التي تلعب دوراً هاماً وأساسي في إحداث الإصابات عبر تناول المياه الملوثة ففي إحدى الجانحات التي ظهرت في السويد أصيب فيها أكثر من 6000 شخص ويقدر عدد المصابين بالنزلات المعوية بحوال 100-60 حالة لكل 100000 شخص في كل سنة، وفي بريطانيا تسجل أكثر من 550000 حالة إصابة بهذا الجنس البكتيري ، وفي أمريكا تسجل حوال 2.4 ملوين حالة سنويا ، إلا أنه وحتى الآن لم يحدد مدى تواجد هذا الجنس البكتيري في شبكات مياه الشرب.

مجموعة الجنس البكتيري Campylobacter Spp المقاومة للتهوية Arcobacter group of aerotolerant campylobacters : تسبب هذه المجموعة الإسهال، وهي لها القدرة على تحمل الهواء ولهذا سميت Aerobacter Spp ويمكن لهذه المجموعة النمو في درجات حرارة 15 ،25  و 36 درجة مئوية ولا يمكنها النمو في درجة حرارة 42 درجة مئوية . ولقد تم عزل النوع البكتيري A. butzleri من مرضى الإيدز وأطفال الدول النامية.

التشخيص المعملي :

شكلها عند الصبغ بصبغة basic fuchin % 1 يظهرها على هيئة لولبية او منحنية ، كما أن بعضها يكون على هيئة جناح النورس gull wings والبعض الآخر يكون على هيئة الحرف اللاتيني S أو واوية الشكل مما يعطي تشخيص إفتراض بإحتمال ان يكون هذا الجنس البكتيري هو المسبب للنزلة المعوية ، كما أنها سالبة لصبغة جرام (المستعمرات البكتيرية غير الجديدة تكون خلاياها على هيئة كريات وذلك نتيجة تعرضها للأوكسجين وهذه المستعمرات لا يمكن أن تنمو من جديد) يتراوح حجمها ما بين     0.4-0.2 ميكرومتر عرضاً و 5-0.5  ميكرومتر طولاً ، غير مكونة للأبواغ وهي بكتيريا متحركة بواسطة سوط يتواجد على احد أو كلا قطبي الخلية البكتيرية ما عدا النوع البكتيري C. gracilis فهو غير متحرك.

خلايا الجنس البكتيري Campylobacter Spp  بصبغة جرام

يعتبر الجنس البكتيري Campylobacter Spp محب للهواء جزئياً 'Microaerophilic' فهو له القدرة على تحمل وجود نسبة قليلة من الأوكسجين ويحتاج عند نموه إلى حوال 5-3 % من غاز ثاني أكسيد الكربون وحوالي 15-3 % من غاز الأكسجين ، ودرجة الحرارة المفضلة حوالي 42 درجة مئوية . ويعتبر النوع البكتيري C. jejuni والنوع البكتيري C. coli من اهم انواع هذه البكتيريا ، وهي ممرضة للإنسان وتتواجد في مياه الشرب بالإضافة للنوع البكتيري C. upsaliensis وتصنف هذه المجموعة على أنها محبة للحرارة thermophilic. من الممكن عزل هذا الجنس البكتيري من عينة البراز باستعمال أحد الطرق التالية:

• طريقة الترشيح باستعمال وسط غذائي غير انتقائي: يتم ترشيح العينة من خلال مرشح بقطر 0.47 مم ذو مسامات بحجم 0.45 ميكرومتر مما يسمح بمرور الجنس البكتيري Campylobacter فقط.

1- يتم إضافة 1 جرام من عينة البراز لــ 10 مل من المحلول الملحي المعقم، مع المزج باستعمال خلاط (vortex mixer) لتكوين معلق بكتيري ، تم يترك في مكانة لمدة دقيقتين ليترسب ، أما إذا كانت عينة البزاز سائلة فلا ضرورة لإضافة المحلول الملحي.

2- يتم وضع المرشح على طبق يحتوي على الوسط الغذائي blood agar أو الوسط الغذائي chocolate agar ، بعد ذلك يتم وضع حوالي 10 قطرات من المعلق البكتيري على المرشح ، مع مراعات عدم تسرب هذه القطرات من حواف المرشح.

3- يترك المرشح بعد ذلك لمدة 60-30 دقيقة ثم ينزع.

4- يتم تحضين الطبق في 43-42 درجة مئوية، وفي ظروف قليلة التهوية، ولمدة 48 ساعة، ومن الممكن تحضينها في 37 درجة مئوية.

• استعمال الوسط الغذائي الانتقائي الذي يحتوي على المضادات الحيوية :

هناك العديد من الأوساط الغذائية التي يمكن أن تستعمل مع إضافة بعض المضادات الحيوية التي تمنع نمو الأجناس البكتيرية غير الممرضة مع إضافة مواد تساعد على النمو growth factors مثل :

ــ الوسط الغذائي Blaser's Medium وهو يحتوي على 10% من دم الخراف والمضاد الحيوي vancomycin والمضاد الحيوي trimethoprim والمضاد الحيوي polymyxin B  والمضاد الحيوي cephalothin  والمضاد الحيوي amphotericin B ويفضل استعمال الوسط الغذائي Brucella agar base ليضم هذه المكونات.

مستعمرات الجنس البكتيري Campylobacter Spp.نامية على الوسط الغذائيBrucella agar

ــ الوسط الغذائي Skirrow's blood agar : وهو يحتوي على دم حصان محلل والمضاد الحيوي polymyxin B والمضاد الحيوي trimethoprim ويتم ذلك باستعمال الوسط الغذائي blood agar base (No.2 Oxoid)

الجنس البكتيري Campylobacter على الوسط الغذائي Skirrow's blood agar

تظهر مستعمرات النوع البكتيري C. jejuni والنوع البكتيري C. coli نمو خال من إحلال لكريات الدم الحمراء.

ــ الوسط الغذائي Butzler virion medium : وهو يحتوي على دم خراف منزوع الفيبرين defibrinated sheep blood ، والمضاد الحيوي Cefoperazone  والمضاد الحيوي rifampicin والمضاد الحيوي colistin والمضاد الحيوي amphotericin B  وباستعمال الوسط الغذائي Columbia agar base.

النوع البكتيري Campylobacter jejuni  على الوسط الغذائي Butzler virion agar

ــ الوسط الغذائي Improved preston free medium : وهو يحتوي على المضاد الحيوي cefoperazone والمضاد الحيوي amphotericin مع الوسط الغذائي Campylobacter blood free agar base وهو يحتوي على الفحم النباتي   charcoalو ferrous sulphate   و sodium deoxycholate  و sodium pyruvate  و casein hydrilysate مع nutrient broth and agar ، هذا الوسط الغذائي يساعد على نمو الجنس البكتيري . Campylobacter Spp عند تحضينه في درجة حرارة 37 درجة مئوية بدلاً من درجة الحرارة 43-42 درجة مئوية . وينصح بعض البحاث بتحضين العينة في درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة ثم تحضينها من جديد في درجة حرارة 42 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. ويرى بعض البحاث أنه الوسط الغذائي الأفضل لنمو وعزل النوع البكتيري C. jejuni.

يكون لون مستعمرات النوع البكتيري C. jejuni رمادية مسطحة، بعض المستعمرات النامية تظهر لوناً مخضراً وتبدو جافة المظهر. اما النوع البكتيري C. coli غالباً ما يظهر مستعمرات رمادية منتفخة بعض الشيء. 

الجنس البكتيري campylobacter Spp على الوسط الغذائي Blood free medium

الاختبارات المعملية :

ــ اختبار الكشف على انزيم oxidase  : موجب.

ــ اختبار الكشف على انزيم catalase : موجب .

ــ اختبار الكشف على انزيم urease : سالب

وهم أهم الاختبارات الافتراضية لتشخصية حالات النزلة المعوية الناتجة من الإصابة بالجنس بالكتيري . Campylobacter Spp

ــ اختبار الكشف على تحلل الهيبورايت Hippurate hydrolysis : وهو يستعمل للتفريق بين النوع البكتيري C. jejuni (موجب) والنوع البكتيري c. coli (سالب).