1- المبدأ Principle

إن الطريقة التي استخدمت في تقدير الكرياتنين في الدم هي طريقة لونية (Colorimetric method) (Jaffe , 1886 ; Henry, 1974) التي يتم فيها تفاعل الكرياتنين الموجود في مصل الدم مع محلول بكرات الصوديوم (Sodium picrate) والذي ينتج عنه محلول احمر من بكرات الكرياتنين (Creatinine picrate) حسب المعادلة الآتية :-

يمكن قراءة شدة لون المعقد والتي تتناسب طردياً مع تركيز الكرياتنين في مصل الدم بجهاز المطياف الضوئي عند طول موجي (nm520) نانومتر مقابل محلول الكفء.

2.3.2- تحضير الكواشف Preparation of Reagents

1. المحلول القياسي (Standard solution) يتكون من الكرياتنين بتركيز (2 mg / 100 ml) 

2. محلول حامض البكريك (Picric acid) بتركيز (35) ملي مول/ لتر.

3. محلول هيدروكسيد الصوديوم NaOH   بتركيز (1.6) ملي مول/ لتر.

تمزج حجوم متكافئة من حامض البكريك وهيدروكسيد الصوديوم لتكوين       (Soduim picrate) والمحلول الناتج يسمى مزيج الكواشف.

4. محلول ثلاثي كلوريد حامض الخليك (TCA) بتركيز (1.2) مول/ لتر.

3- طريقة العمل   Procedure

1. محلول الاختبار  Test Solution

تم وضع (1) مليلتر من محلول (TCA) في أنبوبة اختبار ثم أضيف إليها (1) مليلتر من مصل الدم مع التحريك باستخدام محرك زجاجي ثم وضعت الأنبوبة في جهاز الطرد المركزي بسرعة ( xg2500) دورة/ دقيقة لمدة (10) دقائق ثم تم سحب (1) مليلتر من الجزء الرائق ويضاف إليه (1) مليلتر من مزيج الكواشف.

2. المحلول القياسي   Standard Solution

تم وضع (0.5) مليلتر من محلول الكرياتنين القياسي في أنبوبة اختبار وأضيف إليها (0.5) مليلتر من محلول (TCA) و (1) مليلتر من مزيج الكواشف.

3. محلول الكفء    Black Solution

تم وضع (0.5) مليلتر من الماء المقطر في أنبوبة اختبار وأضيف إليها (0.5) مليلتر محلول حامض (TCA) و (1) مليلتر من مزيج الكواشف. بعدها، مزجت الأنابيب جيداً ثم تركت لمدة (20) دقيقة عند درجة (25°م) لإكمال التفاعل بعدها تم قياس الامتصاص عند الطول الموجي (520 nm) نانومتر.

4- الحسابات Calculations

تم حساب تركيز الكرياتنين في العينة من العلاقة الآتية :-