تعيين الطرف الكربوكسيلي للبروتين (C- terminal amino acid)

يستخدم مركب الهايدرازين في التعرف على الحامض الاميني الطرفي الذي يحتمل الموقع الكربوكسيلي في السلسلة الببتيدية. وتتلخص العملية بتسخين الببتيد، او البروتين مع الهايدرازين الجاف عند درجة الحرارة (100)̊ م ولمدة ستة ساعات، اذ يحول مركب الهايدرازين جميع الأحماض الامينية الى مشتقات الهايدرازيد باستثناء الحامض الاميني ضمن الموقع او الطرف الكربوكسيلي يبقى حرا، ويمكن الكشف عنه للتعرف على هوية هذا الحامض الأميني. 

وبفصل الحامض الاميني الحر، عن بقية مشتقات الاحماض الامينية، يمكننا التعرف على هوية الحامض الاميني الذي يحتل الموقع الكربوكسيلي، وهو في هذه الحالة حامض السيرين.

كما يمكن التعرف على الحامض الاميني الطرفي الذي يحتل الموقع الكاربوكسيلي باستخدام الطرق الانزيمية، مثل انزيمات (Carboxy peptidase)، وتتلخص العملية بقيام هذه الانزيمات بمهاجمة المركب الببتيدي من طرفة الكربوكسيلي وكسر الرابطة بين الحامض الاميني الطرفي والحامض الذي يلعبه محرراً الحامض الذي يحتل الطرف الكربوكسيلي، ويمكن ان يعاود الانزيم الكرة مرة اخرى على الحامض الأميني الطرفي الجديد وبنفس سياق أنزيمات (Amino peptidase)، وبعد عزل الاحماض الامينية المحررة بطرق الفصل التقليدية، يمكننا تحديد نوع الحامض الاميني الذي يحتل الطرف الكربوكسيلي ضمن السلسلة الببتيدية او البروتين.

مواضيع ذات صلة

تصنيف البروتينات classification of proteins

الدنترة (المسخ) Denaturation والتغيرات التي تطرأ على البروتين الممسوخ

التنظيمات البنائية التركيبية للبروتين

البروتينات proteints

الببتيدات Peptides

الأحماض الامينية غير البروتنيية

تصنيف الأحماض الامينية Classification of amino acids

الخصائص الحامضية - القاعدية للأحماض الامينية The acid-base properties of amino acids

الفعالية البصرية للأحماض الامينية Optical activity of amino acids

الأحماض الامينية

محلل الأحماض الأمينية التلقائي Automated amino acid analyzer

تقدير الوزن الجزيئي للبروتينات