الاستشراب الوقي (Paper chromatography)

تطبق هذه التقنية بوضع قطرة من المحلول  الحاوي على الأحماض الأمينية على بعد 5 سم تقريباً من نهاية شريط  ورق الترشيح (Filter paper)، ثم يوضع الشريط. فى وعاء مغلق بحيث تلامس نهايته المذيب (غالباً ما يكون المذيب النموذجي كحولا ذا وزن جزيئي منخفض ومشبعاً بالماء وحاوياً على حمض أو أساس ) ؛ وبعد هجرة المذيب عبر الورقة ، يتم تجفيف الشريط ثم معالجته بالنينهيدرين المحول بالأسيتون وتسخينه لفترة قصيرة فتظهر مواقع الأحماض الأمينية كبقع أرجوانية ( الشكل (7-4. وتملي القطبية النسبية الاستشرابية ، فتتحرك  الأحماض الأمينية ذات الزمر " R " غير القطبية الطويلة (كاللوسين والإيزولوسين والفينيل الانين والتريبتوفان والفالين والميثيونين والتيروزين) إلى مسافات أبعد من تلك التي تقطعها الأحماض ذات الزمر ” R " غير القطبية القصيرة (كالألانين والبرولين) أو الأحماض ذات الزمر ” R " القطبية (كالجلوتامات والثريونين والسيرين والأرجينين والأسبارتات والهيستيدين والليسين والسيستيين) (الشكل 4-7) .

وفيتما يتعلق بمجموعة الأحماض غير القطبية (كالجليسين  واللوسين والفالين والألانين )،  فإن زيادة طول الزمرة ”R“ غير القطبية الذي يزيد من الطابع غير القطبي يؤدي إلى زيادة مدى الحركة.

تعبر القيمة Rf ( التحرك نسبة إلى مقدمة المذيب)  عن نسبة المسافة المقطوعة من قبل الحمض الأميني إلى المسافة المقطوعة من قبل المذيب ، وتختلف قيم Rf الخاصة بحمض أميني معين باختلاف ظروف التجربة (مثل اختلاف المذيب المستخدم). ولعله من المفضل إجراء عملية الاستشراب لشواهد معيارية من الحمض الاميني املعروف من المجهول في الوقت نفسه بحيث يتم التعبير عن مدى تحرك المجهول نسبة إلى الشهاد ، ويكون مقدار التغير في هذه القيمة من تجربة إلى أخرى أقل من مدى تغير قيم Rf .

مواضيع ذات صلة

محلل الأحماض الأمينية التلقائي Automated amino acid analyzer

تقدير الوزن الجزيئي للبروتينات

استخلاص وتنقية البروتينات Isolation and purification of proteins

الكالموديولين Calmodulin

الكارنيتين Carnitine

حامض الليبويك Lipoic acid

حامض البانتوثينك Pantothenic acid

حامض الفوليك Folic acid (الفولاسين Folacin)

تراكيب الأحماض النووية

تقدير البروتين Protein determination

تغيير الحالة الطبيعية للبروتين (المسخ) Denaturation

ذوبانية البروتينات Solubility of proteins