Plate count method APHA 2001 for Enterobacteriaceae in foods

Method of the American Public Health Association (APHA), as described in  the 4th Edition of the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods (Kornacki and Johnson, 2001).

1-  Material required for analysis

Preparation of the sample and serial dilutions

•  Diluent: 0.1% Peptone Water (PW) or Butterfield’s Phosphate Buffer

•  Dilution tubes containing 9 ml 0.1% Peptone Water (PW) or Butterfield’s Phosphate Buffer

Enumeration (pour plate)

•  Sterile, empty 20 × 100-mm Petri dishes

•  Culture medium: Violet Red Bile Glucose (VRBG) Agar

•  Laboratory incubator set to 35 ± 1°C

2 - Procedure

A general flowchart for the enumeration of Enterobacteriaceae in foods using the plate count method APHA 2001 is shown in Figure 1.

a)  Preparation of the samples and serial dilutions.

b) Inoculation. Select three appropriate dilutions of

the sample and inoculate in  Violet Red Bile Glucose (VRBG) Agar. Use the pour plate technique and, after complete solidification of the medium, cover the surface with a 5–8 ml thick layer of the same medium.

c) Incubation. Incubate the plates in an inverted position at 35 ± 1°C/18–24 h.

d) Counting of the colonies and calculating the results. Select plates with 15–150 colonies and count only the typical  Enterobacteriaceae colonies on the VRBG medium: red-purple, 0.5 mm or greater in diameter, surrounded by a reddish halo characteristic of the precipitation of the bile salts.

On crowded plates the colonies may remain small and fail to reach 0.5 mm. Determine the number of CFU/g or ml by multiplying the number of typical colonies by the inverse of the dilution.

Figure 1   Scheme of analysis for the enumeration of Enterobacteriaceae in foods using the plate count method APHA 2001 (Kornacki and Johnson, 2001).

References

Silva, N.D .; Taniwaki, M.H. ; Junqueira, V.C.A.;  Silveira, N.F.A. , Nasdcimento , M.D.D. and Gomes ,R.A.R .(2013) . Microbiological examination methods of food and water a laboratory Manual. Institute of Food Technology – ITAL, Campinas, SP, Brazil .

Kornacki, J.L. & Johnson, J.L. (2001) Enterobacteriaceae, coliforms, and Escherichia coli as quality and safety indicators. In: Downes, F.P. & Ito, K. (eds).  Compendium of Methods for the Microbio-logical Examination of Foods. 4th edition. Washington, American Public Health Association. Chapter 8, pp. 69–82.

اخر الاخبار

اخبار العتبة العباسية المقدسة

العتبة العباسية المقدسة تشارك بأكثر من 750 إصدارًا في معرض بغداد الدولي للكتاب

تيمنًا بذكرى ولادة الصادقَين (صلوات الله عليهما) شعبة التوجيه النسوي تنظم مسابقة ميدانية لزائرات مرقد أبي الفضل العباس (عليه السلام)

المجمع العلمي ينظّم أنشطةً قرآنية في محافظتي كربلاء والديوانية

العتبة العباسية المقدسة تختتم فعاليات مهرجان رحمة للعالمين الدولي الأوَّل

المزيد

الآخبار الصحية

الأطعمة الحارة.. "سر صغير" يغير صحة قلبك وعقلك

وباء صامت.. الملايين حول العالم مصابون بالسكري دون أن يعلموا !

لماذا ينصح بتناول تفاحة يوميا؟

8 فواكه طبيعية تمنحك نوما هنيئا.. وتخلصك من الأرق

المزيد

الآخبار التكنلوجية

ثلاث علامات على وجود مشاكل خطيرة في محرك السيارة ؟

ماذا نعرف عن اللقاح الروسي ضد السرطان؟

مركبة فضاء تعثر على دليل عن وجود حياة قديمة على المريخ

لتدريب الذكاء الاصطناعي.. الصين تخطط لإنشاء شبكة حوسبة موحدة

المزيد

مواضيع ذات صلة

Chlamydia psittaci

Laboratory Diagnosis of Chlamydia trachomatis

Spectrum of Disease of Chlamydia trachomatis

Epidemiology and Pathogenesis of Chlamydia trachomatis

Antigenic Structure, Pathogenesis, and Pathology of Bordetella pertussis

Haemophilus influenzae

Campylobacter jejuni

Conventional Phenotypic Tests for Mycobacterial Infections

Genetic Sequencing and Nucleic Acid Amplification for Mycobacterial Infections

Acid-Fast Stains for Mycobacterial Infections

Vibrio Parahaemolyticus and Vibrio vulnificus

Vibrio Cholerae