المبدأ الاساسي Principle Basic
تم استخدام الطريقة اللونية لحساب تركيز الحديد في الدم . وتعتمد الطريقة على تحلل الحديد الثلاثي التكافؤ Ferric ions الى الحديد الثنائي Ferrous ions في وسط حامضي ضعيف . وايون الحديد الثنائي يكون مع Ferrozine معقد ملون . (1)
الكواشف Reagents
-1 المحلول المنظم Buffer solution R1 :- يحتوي على Acetate بتركيز100 mmolL وبدالة حامضية (pH=4.9).
-2 المحلول المختزل Reductant solution R2 :- يحتوي على حامض الاسكوربك Ascorbic acid بتركيز 99.7%.
-3 المحلول الملون Color solution R3 :-يحتوي على ال Ferrozine بتركيز (40)mmolL
-4 المحلول القياسي Standard solution :- يحتوي على ايونات الحديد بتركيز (100) µgdl
تحضير محاليل العمل Working reagents :- يذاب محلول المختزل R2 في المحلول المنظم R1 ويترك لمدة ربع ساعة قبل الاستعمال .
طريقة العمل Procedure
يضاف µL (200) من كل من مصل الدم والمحلول القياسي ومحلول الكفء (الماء المقطر) الى (1) مللتر من محلول العمل WR وبعدها تضاف قطرة واحدة من المحلول الملون R3 وترج محتويات كل انبوبة رجاً جيداً وتحضن بدرجة (37) ̊C لمدة (5) دقائق او بدرجة حرارة الغرفة لمدة (10) دقائق . وتقرأ امتصاصية العينة والمحلول القياسي مقابل المحلول الكفء باستخدام جهاز المطياف الضوئي عند الطول الموجي nm (562) .
الحسابات Calculation
يحسب مستوى تركيز الحديد في مصل الدم بوحدة ( µgdl) وفق القانون الآتي:
------------------------------------------
1. Itano M. M.D. (1978)," Cap Serum Iron Survey", (70): 516-522.
