المرجع الالكتروني للمعلوماتية
المرجع الألكتروني للمعلوماتية

علم الاحياء
عدد المواضيع في هذا القسم 9503 موضوعاً
تاريخ علم الأحياء وعلمائه
النبات
الحيوان
الأحياء المجهرية
علم الأمراض
التقانة الإحيائية
التقنية الحياتية النانوية
علم الأجنة
الأحياء الجزيئي
علم وظائف الأعضاء
المضادات الحيوية

Untitled Document
أبحث عن شيء أخر


Plate count method ISO 13720:2010 for presumptive Pseudomonas spp. in meat and meat products  
  
2120   12:52 صباحاً   date: 17 / 3 / 2016
Author : SILVA, N.D .; TANIWAKI, M.H. ; JUNQUEIRA, V.C.A.; SILVEIRA, N.F.A. , NASCIMENTO , M.D.D. and GOMES ,R.A.R
Book or Source : MICROBIOLOGICAL EXAMINATION METHODS OF FOOD AND WATE A Laboratory Manual
Page and Part :


Read More
Date: 20 / 3 / 2016 980
Date: 8 / 3 / 2016 1174
Date: 7 / 3 / 2016 1145

Plate count method ISO 13720:2010 for presumptive  Pseudomonas spp. in meat and meat products

 

This method of the International Organization for Standardization is applicable to meat and meat products, including poultry.

1. Material required for analysis

Preparation of the sample and serial dilutions

•  Diluent: Saline Peptone Water (SPW) or Buffered Peptone Water (BPW)

•  Dilution tubes containing 9 ml of Saline Peptone Water (SPW) or Buffered Peptone Water (BPW)

Enumeration of presumptive Pseudomonas spp.

•  Cephalothin Sodium Fusidate Cetrimide (CFC) Agar

•  Oxidase Kovacs Reagent

•  Laboratory incubator set to 25 ± 1°C

2. Procedure

A general flowchart for the enumeration of presumptive Pseudomonas spp. in meat and meat products using the plate count method ISO 13720:2010 is shown in Figure 1.

a)  Preparation of the samples, inoculation and incubation: For the preparation of the sample and serial dilutions . Select three appropriate dilutions of the sample and inoculate 0.1 ml of each dilution on Cephalothin Sodium Fusidate Cetrimide (CFC) Agar plates, using the spread plating technique.

 Figure 1   Scheme of analysis for the enumeration of presumptive  Pseudomonas spp. in meat and meat products using the plate count method ISO 13720:2010.

 

Note a.1)   Three dilutions are the number usually inoculated, but the ISO 7218:2007 allows the inoculation of less than three dilutions. When at least two successive dilutions are inoculated, only one plate per dilution is required. If only one dilution is inoculated, then two plates are required.

    Incubate the plates inverted at 25 ± 1°C/44 ± 4 h. Count all the colonies on each plate and select plates with less than 150 colonies for confirmation.

b) Confirmation: From each plate with less than 150 colonies, select five for confirmation. If there are fewer than five, select all. Include all colony types from each retained plate for confirmation.

b.1)  Oxidase test: Using a platinum/iridium loop or glass rod, take a portion the colony and streak it onto a filter paper moistened with the Oxidase Kovacs Reagent. The appearance of a violet to purple color within 10s indicates a positive reaction. If the color has not changed after 30s, the test is considered negative.

c)  Calculation of the results: Consider as presumptive Pseudomonas spp. the cultures showing positive oxidase test.

c.1)  First it is necessary to calculate the number of colonies of presumptive Pseudomonas spp. present in each plate retained for count (all the plates containing less than 150 colonies). Use the formula below for this calculation and round the result to a whole number.

a =  number of presumptive Pseudomonas spp. in the plate

b = number of colonies confirmed

A = number of colonies tested

C = total number of colonies counted

  Example: Total number of colonies in a plate (C)  = 139; number of colonies selected for confirmation (A)  = 5; number of colonies confirmed (b)  = 4. Number of presumptive Pseudomonas spp. colonies in the plate (a)  = 139 × 4/5 = 111.

c.2)  after that it is necessary to calculate the number of presumptive Pseudomonas spp. colony forming units (CFU) per gram or milliliter of the sample, witch is the sum of presumptive Pseudomonas spp. colonies (a) obtained in each plate divided for the sum of sample quantity inoculated in each plate. Use the formula below for this calculation and round the result to a whole number (examples 1 and 2)

Example 1

Example 2

Example 3

Example 4

Example 5

Σa =  Sum  of  presumptive  Pseudomonas spp. colonies in each plate

V = Volume of inoculum in each plate

n1 = number of plate retained at the first dilution counted

n2 = number of plate retained at the second dilution counted

d = dilution factor corresponding to the first dilution retained

If the dishe (s) at the level of the initial suspension contain less than 15 colonies of presumptive Pseudomonas spp., calculate the result as described above and report the count as estimated (examples 3 and 4). If the dishe(s) at the level of the initial suspension do not contain any colonies, calculate the result as described above for one colony and report the count as “less than the value obtained” (example 5).

 

References

Silva, N.D .; Taniwaki, M.H. ; Junqueira, V.C.A.;  Silveira, N.F.A. , Nasdcimento , M.D.D. and Gomes ,R.A.R .(2013) . Microbiological examination methods of food and water a laboratory Manual. Institute of Food Technology – ITAL, Campinas, SP, Brazil .

International Organization for Standardization (2010) ISO 13720:2010. Meat and meat products – Enumeration of presumptive Pseudomonas spp. Geneva, ISO.




علم الأحياء المجهرية هو العلم الذي يختص بدراسة الأحياء الدقيقة من حيث الحجم والتي لا يمكن مشاهدتها بالعين المجرَّدة. اذ يتعامل مع الأشكال المجهرية من حيث طرق تكاثرها، ووظائف أجزائها ومكوناتها المختلفة، دورها في الطبيعة، والعلاقة المفيدة أو الضارة مع الكائنات الحية - ومنها الإنسان بشكل خاص - كما يدرس استعمالات هذه الكائنات في الصناعة والعلم. وتنقسم هذه الكائنات الدقيقة إلى: بكتيريا وفيروسات وفطريات وطفيليات.



يقوم علم الأحياء الجزيئي بدراسة الأحياء على المستوى الجزيئي، لذلك فهو يتداخل مع كلا من علم الأحياء والكيمياء وبشكل خاص مع علم الكيمياء الحيوية وعلم الوراثة في عدة مناطق وتخصصات. يهتم علم الاحياء الجزيئي بدراسة مختلف العلاقات المتبادلة بين كافة الأنظمة الخلوية وبخاصة العلاقات بين الدنا (DNA) والرنا (RNA) وعملية تصنيع البروتينات إضافة إلى آليات تنظيم هذه العملية وكافة العمليات الحيوية.



علم الوراثة هو أحد فروع علوم الحياة الحديثة الذي يبحث في أسباب التشابه والاختلاف في صفات الأجيال المتعاقبة من الأفراد التي ترتبط فيما بينها بصلة عضوية معينة كما يبحث فيما يؤدي اليه تلك الأسباب من نتائج مع إعطاء تفسير للمسببات ونتائجها. وعلى هذا الأساس فإن دراسة هذا العلم تتطلب الماماً واسعاً وقاعدة راسخة عميقة في شتى مجالات علوم الحياة كعلم الخلية وعلم الهيأة وعلم الأجنة وعلم البيئة والتصنيف والزراعة والطب وعلم البكتريا.




بالصور: دموع امتزجت بحروف الدعاء.. عدسة الموقع الرسمي توثق مراسيم احياء ليالي القدر المباركة
دورة للعاطلين عن العمل وتاركي الدراسة.. العتبة الحسينية تواصل برامجها الخاصة بالشباب لتطوير مهاراتهم ومساعدتهم بالدخول الى سوق العمل
بعد انجاز (14) غرفة حصينة بمواصفات عالمية وضمن معايير الجودة.. مشروع الوارث لعلاج الامراض السرطانية سيكون الأول من نوعه في العراق
خصص لمعالجة المواطنين من عموم العراق (مجانا).. (600) حالة استقبلها مركز الوارث لغسيل الكلى الذي افتتحته العتبة الحسينية قبل (40) يوما