المرجع الالكتروني للمعلوماتية
المرجع الألكتروني للمعلوماتية
Untitled Document
أبحث عن شيء أخر المرجع الالكتروني للمعلوماتية
الترابط بين الشهادة والغيب
2025-03-17
علاقتنا بالغيب
2025-03-17
معنى الغيب والشهادة
2025-03-17
الشفاء بالماء
2025-03-17
مرض تجعد الأوراق المتسبب عن الفطر Tephrina
2025-03-17
أسرة الملك (تهرقا)
2025-03-17

المقاييس في البحوث الإعلامية
2025-01-15
اغذية تآزر العلاج الحيوي Synbiotic Foods
20-5-2020
مسؤولية مجلس الادارة تجاه الغير
26-6-2016
الكلورة الفائقة Superchlorination
6-5-2020
الصحاح الست لعلماء السنة
26-4-2018
دودة ورق العنب
24-11-2021


تحليل polymerase chain reaction


  

1277       11:03 صباحاً       التاريخ: 6-2-2017              المصدر: د. حنين ولى و د. مصري خليفة

أقرأ أيضاً
التاريخ: 2025-01-26 228
التاريخ: 2-2-2017 4113
التاريخ: 15-2-2016 1696
التاريخ: 7-2-2017 1864
التاريخ: 8-2-2017 1199
تحليل PCR (polymerase chain reaction)
 
المقدمة
تحفظ المعلومات الوراثية وإنتاج المواد لصنع الخلايا والحفاظ عليها في داخل الحمض النووي DNA وتقوم الخلية بمضاعفة كمية الحمض النووي وقت انقسام الخلية بشكل تلقائي وبشكل سريع مع وجود نظام تصحيح للاخطاء خلال النسخ . وتلبغ سرعة النسخ والمضاعفة الى 1000 قاعدة نيتروجينية بالثانية (داخل النظام الحيوي) وهي كما ذكرنا تحدث في الخلية في وقت التكاثر والانقسام فقط .
ومع التطور في مجال التكنولوجيا الحيوية والذي يقوم على التعامل مع الحمض النووي DNA) بشكل أساسي ، استدعى ذلك العلماء على ان يبحثوا عن طريقة او تقنية تقوم على مضاعفة كمية الحمض النووي DNA) بشكل كبير ، فكان هناك عدة محاولات لتنشيط الخلية على الانقسام المستمر بإضافة عوامل النمو growth factors ، ولكن هذه الطريقة لم تكن ذات جدوى لدى العلماء لاسباب كثيرة . الى ان توصل العالم د . كري مولس Dr . Kerry Mullis في عام 1985 (وقد حصل على جائزة نوبل في الكيمياء عام 1993) بنشر اختراعه لتقنية البي سي آر PCR فكانت هذه التقنية بوابة لكثير من التطورات المتسارعة في مجال التكنولوجيا الحيوية ، من اهم الأسباب التي ساعدت هذه التقنية على الانتشار عدم اعتمادها على النظام الحيوي (أي الخلية) والتحكم بكمية الحمض النووي (DNA) وسرعة في الإنتاج ولكن كان من عيوب هذه التقنية عدم وجود نظام اصلاح أخطاء الارتباط الخاطئ miss match .
ما هو PCR :
هو تقنية مخبرية تم اكتشافها عام 1983م تقريبا تقوم على اكثار نسخ الحمض النووي (DNA) خارج النظام الحيوي . أي انها طريقة لنسخ الحمض النووي في المختبر . ولذلك فهي تقنية حيوية لاستنساخ قطعة محددة من الحمض النووي ومضاعفة انتاجها لكي يتسنى اجراء عليه اختبارات وفحوصات إضافية .
 
تفاعل البوليمراز السلسي PCR (polymerase chain reaction)
تهدف تقنية PCR الى تضخيم ، بعد استخلاصه من خلايا او سوائل الجسم وبالتالي الحصول على كميات كبيرة منه يمكن اجراء التحليل عليه .تعرف هذه التقنية بالتفاعل السلسلي لانزيم بلمرة الحامض النووي DNA وتعتمد فكرة هذا التفاعل على إمكانية تضخيم Amplification واكثار جزيئات قليلة من الحمض النووي DNA وعمل ملايين النسخ منها دون الحاجة لعزلة ويمكن اجراء التحليل على هذه النسخ ، حيث يمكن لهذا التفاعل ان ينتج 100 مليار جزيء من الـ DNA من جزيء واحد فقط في لحظة البدء وخلال 6 ساعات فقط .
متطلبات تقنية PCR
الحامض النووي المزدوج Double Stranded المحتوي على الجزء المطلوب نسخه . بادئ محضر صناعيا معروف نظام تعاقبه Oligannucleotid primer ويتكون من 20 نبوكليوتيدة . انزيم بلمرة خاص مقاوم للحرارة ، ونجح الباحثون في الحصول على هذا الانزيم وعزله من البكتريا المحبة للحرارة العالية المعروفة باسم Thermus aquatic . خطوات تنقية الـ PCR :
1- يتم فصل الحلزون المزدوج لشريطي الحامض النووي الى خيط مفرد عن طريق عملية الدنترة (المسخ) Denaturation بتسخينه الى درجة حرارة من 94 – 95مْ .
2- يضاف البادئ المعروف تسلسله النووي الى الحامض النووي المفرد وتتم بعد ذلك عملية تبريد وتقوية nealing يخفض درجة الحرارة الى 37مْ – 65مْ اعتمادا على مدى التطابق بين البادئ المستخدم والحامض النووي .
3- يتم استطالة Extension للحامض النووي عند درجة 70 – 75مْ باستخدام الانزيم المقاوم للحرارة .
يتم تكرار الثلاث خطوات من التسخين وتقوية واستطالة للحامض النووي باستخدام نفس الانزيم السابق حتى يتم الحصول في النهاية على Unit length double stranded DNA .
وحاليا يستخدم جهاز ذاتي يعمل بمضاعفة جزئيات حامض DNA ويعرف باسم Automated Thermal Cycler وهو يستخدم الآن على نطاق واسع في معامل الأبحاث . وفي هذا الجهاز ترتفع درجة الحرارة آليا لاتمام عملية فك الشريط الحلزوني ثم تنخفض آليا لاتمام بناء الشريط موضح ادناه .
تطبيقات PCR :
لتقنية PCR تطبيقات كثيرة في مجال أبحاث الحمض النووي (DNA) والوراثة ومنها :
1) الكشف عن الطفرات الوراثية : وذلك عن طريق وضع بريمر خاص للطفرة لتكثير الجبن الخاص بها ومنه نقوم بمعرفة المرض اذا كان على زوجين الكروموسومات او على احدهما (allele) .
2) تعين البصمة الوراثية .
3) الكشف عن الفيروسات : وهذه الطريق هي الادق في تحديد نوع وجنس الفيروس وكميته حيث يستخدم في الكشف عن فيروس التهاب الكبد الوبائي .
4) هو العنصر الأهم في عملية التجميع الجيني (Recombinant DNA) الحمض النووي : حيث نقوم بتكثير الجين المراد إدخاله على اللازمد او الحمض النووي (DNA) المضيف .
5) استخدامه في تغير نهايات الجين لتصبح متوافقة مع انزيمات القطع estriction enzyme .
6) هو العملية الأساس في تحديد تتابع القواعد النيتروجينية في الحمض النووي (DNA) الحمض النووي .(DNA Sequencer ) .
7) معرفة طول الحمض النووي (DNA) .
8) تقنية الحمض النووي (DNA) المكمل
9) تحديد الجين المطلوب من خليط من الجينات .
10) يستخدم في تقنية (microarrays) .
11) في مشروع الخارطة الجينية البشرية .(human genome project) .
12) الساوثرين بلوت (southern plot) .
13) تقنية ارتباط الحمض النووي – (DNA) وبروتين الحمض النووي (DNA ) -Protein Interaction) .
14) في مجال الطب الشرعي (اختبار الامومة ، حالات الاغتصاب ، تحديد الهوية . . الخ) .


Untitled Document
محمد الموسوي
حمى التيفوئيد typhoid fever
محمد المدني
تطبيق تقنية النانو في شبكات الجيل الخامس: الابتكار...
علاء كاظم عثمان الذرب ال ازيرج
مهزلة كثرة الشيوخ.. إلى أين
د.أمل الأسدي
كيف أشطب يوما من ذاكرتي (الجزء الثاني)
د. فاضل حسن شريف
ادغام أو اخفاء النون الساكنة (سورة البقرة) (ح 3)
زيد علي كريم الكفلي
موسم الطاعات وصايا المعصوم للصائمين
د. فاضل حسن شريف
(: المد المنفصل) وتطبيقات من القرآن الكريم في سورة آل...
الشيخ أحمد الساعدي
المرأة ودورها المحوري في بناء جيل مهدوي
أقلام بمختلف الألوان
جوائز مسابقة كنز المعرفة لشهر شباط 2025
د.أمل الأسدي
جكليت مُر
قصص وعظات
الصَّبْرُ شَجَاعَةٌ
علي الفتلاوي
الينابيع الحارة أو الحرارية
محمد المدني
"الطاقة المتجددة: رهان العالم نحو مستقبل مستدام"
صادق الياسري
الفيروسات